快速掌握菌落計數(shù)器的核心結(jié)構(gòu)的選型方法

　　菌落計數(shù)器因其使用的自動化程度高、分析結(jié)果可核對、樣品信息可留存等，已逐漸被越來越多的科研院所、衛(wèi)生疾控部分所喜愛。現(xiàn)今，大部分菌落計數(shù)器均是采用成像分析法實現(xiàn)自動計數(shù)的，即由成像硬件+分析軟件所組成，這二塊內(nèi)容的任何一塊上出現(xiàn)失分，都會嚴(yán)重影響計數(shù)分析結(jié)果的穩(wěn)定性。下面我們就來介紹下成像硬件和分析軟件的選型方法。

　　一、成像硬件的選型

　　成像硬件用于獲得清晰有效的菌落圖像，以便分析計數(shù)。現(xiàn)今的成像硬件有拍照成像的、掃描成像的。由攝像頭拍照成像的優(yōu)點是：成像速度快，能確保在0.5秒內(nèi)獲得菌落圖像。由單反相機(jī)、卡片機(jī)拍照成像的優(yōu)點是：能自動對焦、且像素分辨率一般更高，但其成像需要3～4秒的時間。然而，拍照成像的致命弱點是：成像環(huán)境中的光線強(qiáng)度，無論是暗視野，還是背光，想要做到圖像中心與邊緣保持*一致，是不可能的。從而引起平皿上亮度的不一致，這就嚴(yán)重干擾了菌落目標(biāo)的自動識別。因此，如果要選購拍照成像的，其分析軟件就一定要具有背景矯正功能，以便自動改善成像的效果。掃描成像與在燈箱中營造均勻面光源不同，是將線光源通過移動變成面光源的，因此光線強(qiáng)度非常均勻，其均勻度通常比拍照燈箱的面光源要高一個數(shù)量級，從成像硬件的根本上解決了菌落目標(biāo)的亮度不勻問題，因此計數(shù)分析非常穩(wěn)定。目前，以300dpi分辨率（3482×2396像素成像）掃描6個90mm直徑平皿的速度，暗視野成像約12秒、背光成像約20秒，就其成像速度而言，與單反相機(jī)、卡片機(jī)拍照成像的速度相當(dāng)。由于掃描成像的光線均勻度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于拍照成像，為獲得高質(zhì)量的成像效果，以便實現(xiàn)“傻瓜式”分析。掃描成像的另一優(yōu)點是：成像分辨率可調(diào)，單平皿成像高可達(dá)4800dpi（即：25.4/4800=0.00529mm/像素），是任何拍照成像遠(yuǎn)不及的。可以預(yù)期：掃描成像將很快成為主流選擇。

　　二、分析軟件的選型

　　分析軟件是菌落計數(shù)器的另一塊核心成分。因為菌落生物的存在多樣性，在培養(yǎng)基上的表現(xiàn)或顯像不可能大體一致，針對這類變化，在分析軟件選型上要考慮：對于各類成像干擾的自動排出能力。比如：是否能自動矯正背景，等等。另外，對于嚴(yán)重粘連在一起的團(tuán)裝、鏈狀分布菌落，將其自動分割開來的水平，也是評價分析軟件的考量指標(biāo)。尤其是：對于同類菌落的“一鍵”化的智能分類計數(shù)能力，以及對于菌落計數(shù)分類的自動識別學(xué)習(xí)能力，更是評價分析軟件的關(guān)鍵考量指標(biāo)。現(xiàn)在比較好的分析軟件，還集成了對6個90mm直徑平皿的抑菌圈全自動測量功能，以及對抗生素效價分析、藥敏分析功能，可避免用戶重復(fù)購置成像用的硬件。一般分析軟件都具應(yīng)具備對于分析結(jié)果和標(biāo)記圖像的保存、查看功能。